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Immunoterapia: i progressi nella modifica genetica si estendono al diabete di tipo 1

La dott.ssa Jane Buckner del Benaroya Research Institute di Virginia Mason e il dott. David Rawlings del Seattle Children’s Research Institute stanno conducendo ricerche per sviluppare un’immunoterapia per il diabete di tipo 1.

I progressi nella progettazione di cellule T per il trattamento del cancro stanno aprendo la strada a nuove immunoterapie mirate alle malattie autoimmuni, incluso il diabete di tipo 1. Ora, i ricercatori stanno anche studiando terapie che riprogrammano le cellule T per “abbattere” una risposta immunitaria, che potrebbe essere promettente per la cura del diabete di tipo 1, così come una serie di malattie in cui le cellule T iperattive attaccano le cellule e gli organi sani di una persona.

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“Invece di stimolare il sistema immunitario a cercare e distruggere le cellule cancerose , il trattamento delle condizioni autoimmuni richiederà la programmazione delle cellule T di un paziente per dire alle cellule immunitarie canaglia di calmarsi”, ha detto il dott. David Rawlings, direttore del Centro per le Immunità e la Immunoterapia. Seattle Children’s Research Institute dell’ospedale pediatrico di Seattle.
Sfruttare le tecniche di modifica genica introdotte dal Seattle Children’s: Rawlings e colleghi hanno già fatto progressi nell’equipaggiare le cellule T con le istruzioni necessarie per invertire il diabete di tipo 1 . In un nuovo progetto di ricerca finanziato con $ 2 milioni da Leona M. e Harry B. Helmsley Charitable Trust, i ricercatori sfrutteranno questi recenti successi usando questa nuova forma di immunoterapia a cellule T in sperimentazioni cliniche: le prime umane.

Sviluppo dell”immunoterapia contro il diabete di tipo 1
La nuova ricerca continua la collaborazione con il Benaroya Research Institute di Virginia Mason, sulla base dei progressi significativi ottenuti dai team di ricerca congiunti dopo aver ricevuto una sovvenzione di $ 1 milione dall’Helmsley Charitable Trust nel 2016.
Nei loro studi iniziali, gli scienziati sono riusciti a utilizzare l’editing genico per generare cellule T umane che funzionano come cellule regolatrici, un tipo di cellula immunitaria che modera la risposta del sistema immunitario. Queste cellule T regolatorie ingegnerizzate erano in grado di spegnere le cellule T effettrici “pericolose” sia in laboratorio che in studi su animali. In parallelo, i ricercatori sono stati in grado di isolare le cellule T che hanno riconosciuto uno specifico target “antigene” e trasformare queste cellule effettrici specifiche dell’antigene in cellule T regolatorie.
I loro nuovi studi sono progettati per individuare le cellule T effettrici pericolose che malfunzionano e attaccano il pancreas nel diabete di tipo 1, prevenendo la produzione di insulina e trasformandole in cellule T regolatorie.
“Queste cellule T regolatorie ingegnerizzate, una volta restituite al corpo di un diabetico, avrebbero il potenziale per impedire alle cellule T effettrici di distruggere le cellule produttrici di insulina”, ha detto Rawlings. “Riteniamo che queste cellule potrebbero essere utilizzate per trattare il diabete di tipo 1 all’inizio, probabilmente portando a una cura a lungo termine”.

La prossima fase della ricerca continuerà ad attingere alla vasta esperienza della dott.ssa Jane Buckner, presidente del Benaroya Research Institute, e ai suoi colleghi per isolare e indirizzare le cellule immunitarie del pancreas.
“Il vantaggio dell’utilizzo di cellule T regolatorie per la terapia è che le cellule T possono concentrare la soppressione immunitaria su un organo specifico senza compromettere l’intero sistema immunitario”, ha affermato Buckner. “Per il diabete di tipo 1, vogliamo garantire che le cellule T ingegnerizzate viaggino verso il pancreas e fermino qualsiasi attacco di cellule T nel pancreas, lasciando intatte le cellule immunitarie sane “.

Un nuovo trattamento per sostituire le iniezioni di insulina
La speranza di Rawlings e Buckner è che questa ricerca porti a nuovi trattamenti per migliorare la vita di chi combatte il diabete di tipo 1. Credono che un trial clinico che offre un prodotto di immunoterapia alle cellule T per pazienti con diabete di tipo 1 sia all’orizzonte.
“L’obiettivo finale di questa ricerca è di portare un’immunoterapia T-cellulare regolamentata ai pazienti”, ha detto Rawlings.
Un’immunoterapia erogata attraverso un’infusione di cellule T regolatorie ingegnerizzate potrebbe proteggere i nuovi pazienti che stanno sviluppando il diabete di tipo 1 dal fabbisogno per tutta la vita della terapia insulinica.
I pazienti affetti da diabete di tipo 1 come la tredicenne Juliana Graceffo devono assumere dosi di insulina accuratamente calcolate durante il giorno per cercare di mantenere livelli ideali di zucchero nel sangue. Dare ai pazienti l’insulina – attraverso iniezioni o una pompa per insulina – è attualmente l’unico trattamento per il diabete di tipo 1. Poiché i pazienti viene spesso diagnosticato il diabete di tipo 1 durante l’infanzia, la gestione e il trattamento del patologia diventa uno stile di vita e, se il controllo non viene mantenuto, le fluttuazioni della glicemia portano a danni cronici agli organi nel tempo.
“È difficile trattare con il diabete di tipo 1 ogni giorno”, ha detto Juliana. “Una cura significherebbe che non devo pensare al diabete tutto il tempo, e posso solo essere normale.”
Oltre il diabete
L’immunoterapia del diabete di tipo 1 è una delle molte promettenti terapie geniche e cellulari in fase di sviluppo presso Seattle Children’s.
In laboratorio, Rawlings ha aperto la strada a un’innovativa tecnica di modifica genetica che conferisce alle cellule T la capacità di resistere all’infezione da HIV e contemporaneamente uccide le cellule T infette da HIV o i tumori delle cellule B. Più recentemente, con il suo collega Dr. James James, hanno usato il gene editing per generare cellule B che secernono proteine ??terapeutiche.
La modifica genetica è destinata ad avere un impatto sulla medicina pediatrica su molti fronti, e viene ora applicata da ricercatori che lavorano per curare il cancro, malattie autoimmuni e disordini genetici come una grave immunodeficienza combinata e anemia falciforme. Per portare avanti questo lavoro più rapidamente, il team di Rawlings sta anche collaborando con Casebia Therapeutics, leader del settore di editing genetico, per sviluppare e concedere nuove terapie per prevenire e curare le malattie autoimmuni usando le cellule T regolatorie modificate dal gene CRISPR / Cas9 .
“La conoscenza acquisita attraverso il nostro lavoro con Casebia rischia di estendersi a diabete di tipo 1, al trapianto di organi, altre condizioni autoimmuni e malattie genetiche”, ha detto Rawlings. “Siamo entusiasti di continuare a portare avanti questa promettente ricerca.”



Un composto antistress riduce l’obesità e il diabete Tipo 2

Per la prima volta, gli scienziati del Max Planck Institute of Psychiatry di Monaco di Baviera hanno dimostrato che una proteina dello stress presente nei muscoli ha un effetto che promuove il diabete. Questa scoperta potrebbe aprire la strada a un approccio terapeutico completamente nuovo. La ricerca è pubblicata oggi sulla rivista scientifica Nature Communications..

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Da qualche tempo, i ricercatori sanno che la proteina FKBP51 è associata a depressione e disturbi d’ansia.  Coinvolta nella regolazione del sistema dello stress – quando non funziona correttamente; possono svilupparsi disturbi mentali. Ora, i ricercatori del Max Planck Institute of Psychiatry hanno scoperto un nuovo, sorprendente ruolo per questa proteina: agisce come un collegamento molecolare tra il sistema di regolazione dello stress e i processi metabolici nel corpo.

“L’FKBP51 influenza una cascata di segnalazioni nel tessuto muscolare, che con un apporto calorico eccessivo porta allo sviluppo di intolleranza al glucosio, cioè l’indicatore chiave del diabete di tipo 2”, riassume il leader del progetto Mathias Schmidt. Una dieta malsana, ricca di grassi significa stress per il corpo. Se il FKBP51 viene prodotto sempre più nel muscolo, porta a un ridotto assorbimento del glucosio – di conseguenza, può portare allo sviluppo del diabete e obesità.

Se l’FKBP51 è bloccato, il diabete non si svilupperà, anche se vengono consumate troppe calorie o il corpo è ancora stressato. Meno FKBP51 nel tessuto muscolare significa ridotta intolleranza al glucosio e quindi mantenimento del normale metabolismo.

L’antagonista fornisce un nuovo approccio terapeutico

La proteina FKBP51 può essere bloccata farmacologicamente da composti antagonisti che sono stati sviluppati presso l’Istituto Max Planck da Felix Hausch (attualmente presso l’Università di Darmstadt). In collaborazione con gli scienziati dell’università tecnica di Darmstadt e finanziati dal Ministero degli affari economici e dei mezzi di comunicazione della Baviera, energia e tecnologia, questi composti saranno ulteriormente processati per essere utilizzati nelle sperimentazioni cliniche. “Questi risultati possono fornire un approccio terapeutico completamente nuovo per il diabete e altre malattie metaboliche”, afferma Alon Chen, direttore del Max Planck Institute of Psychiatry.



Gli scienziati russi hanno sviluppato nuovi approcci per il trattamento del diabete

Un team di scienziati dell’Università Federale degli Urali (UrFU) e del Dipartimento dell’Accademia Russa delle Scienze ha modellato il diabete di tipo 1 in un esperimento per studiare i processi di recupero nel pancreas.

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Un gruppo di scienziati dell’Università Federale degli Urali (UrFU) e dell’Istituto di Immunologia e Fisiologia (IIP, Dipartimento degli Urali dell’Accademia Russa delle Scienze) ha modellato il diabete di tipo 1 in un esperimento per studiare i processi di recupero nel pancreas. I risultati dello studio aiuteranno a sviluppare nuovi approcci per il trattamento del diabete. L’articolo dei ricercatori è stato pubblicato sulla rivista Biomedicine & Pharmacotherapy.

“Abbiamo deciso di creare nuovi approcci per la prevenzione e il trattamento del diabete utilizzando composti chimici antidiabetici sintetizzati.E ‘stato importante per noi capire la modalità della loro azione su cellule, tessuti, organi e a livello corporeo” – ha detto Irina Danilova, autrice della ricerca, responsabile di una borsa della Russian Science Foundation, dottore in biologia, capo del dipartimento di biochimica medica e biofisica di UrFU e capo del laboratorio di morfologia e biochimica presso il dipartimento degli Urali dell’Accademia Russa delle scienze.

Il diabete di tipo 1 è una grave malattia cronica causata dalla cessazione della produzione di insulina nel pancreas che porta ad un aumento dei livelli di zucchero nel sangue e a danni graduali su diversi organi e tessuti. Ad esempio, alti livelli di glucosio nel sangue attivano lo stress ossidativo – maneggiando le proteine, lipidi e molecole del DNA da parte dei radicali liberi. Un altro notevole meccanismo di danno tissutale associato al diabete è la glicosilazione non enzimatica (glicazione) delle proteine. Nel corso di questo processo il glucosio interagisce con gruppi amminici di proteine ??senza la partecipazione di enzimi. Nelle persone sane questa reazione è lenta, ma se il livello di zucchero nel sangue è alto, la glicazione si accelera e provoca danni irreversibili ai tessuti.

I pazienti con diabete di tipo 1 necessitano di iniezioni giornaliere di insulina. Gli scienziati sono interessati a trovare un composto chimico che attivi i processi di rigenerazione nelle cellule danneggiate dai radicali liberi. Per farlo, hanno deciso di studiare il potenziale dei composti che sono in grado di eliminare sia il metabolismo (stress ossidativo e glicemia proteica) sia i disordini immunologici (risposta infiammatoria) associati al diabete.

Prima di tutto, hanno selezionato i composti eterociclici di 1,3,4-tiadiazina sintetizzati in UrFU nel Dipartimento di Chimica Organica e Biomolecolare sotto la guida di Oleg Chupakhin (Accademia Russa delle Scienze). Queste sostanze hanno proprietà antiossidanti e anti-glicazione. Quindi i ricercatori hanno testato i composti su ratti da laboratorio con diabete.

“Abbiamo cercato di eliminare i disordini associati al diabete utilizzando sostanze derivate di 1,3,4-tiadiazina e, di conseguenza, i livelli di glucosio e di emoglobina glicosilata nel sangue dei ratti sono diminuiti e il livello di insulina è aumentato. i composti che bloccano il meccanismo patogenetico di cui sopra possono potenzialmente essere trasformati in farmaci per il trattamento di questa malattia socialmente significativa “- ha concluso Irina Danilova.



Gli scienziati dell’Istituto Salk modificano il CRISPR per trattare epigeneticamente diabete, malattie renali, distrofia muscolare

Gli scienziati dell’Isituto Salk hanno creato una nuova versione della tecnologia di editing del genoma CRISPR / Cas9 che consente di attivare i geni senza creare interruzioni nel DNA, aggirando potenzialmente un ostacolo importante all’utilizzo di tecnologie di modifica genetica per curare le malattie umane.

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La maggior parte dei sistemi CRISPR / Cas9 funziona creando “interruzioni a doppio filamento” (DSB) in regioni del genoma destinate al montaggio o alla cancellazione, ma molti ricercatori sono contrari a creare tali interruzioni nel DNA degli esseri umani viventi. Come prova del concetto, il gruppo Salk ha usato il loro nuovo approccio per trattare diverse malattie, tra cui diabete, la malattia renale acuta e distrofia muscolare, nei modelli murini.

“Sebbene molti studi abbiano dimostrato che CRISPR / Cas9 può essere applicato come un potente strumento per la terapia genica, crescono le preoccupazioni riguardo alle mutazioni indesiderate generate dalle rotture del doppio filamento attraverso questa tecnologia”, afferma Juan Carlos Izpisua Belmonte, professore del Salk Gene Expression Laboratory e autore senior del nuovo documento, pubblicato su Cell il 7 dicembre 2017. “Siamo stati in grado di aggirare questa preoccupazione.”

Nel sistema originale CRISPR / Cas9, l’enzima Cas9 è accoppiato con gli RNA guida che lo indirizzano nel punto giusto del genoma per creare DSB. Recentemente, alcuni ricercatori hanno iniziato a usare una forma “morta” di Cas9 (dCas9), che può ancora indirizzare specifici posti nel genoma, ma non taglia più il DNA. Invece, dCas9 è stato accoppiato con domini di attivazione trascrizionale – interruttori molecolari – che attivano geni mirati. Ma la proteina risultante – dCas9 collegata agli interruttori attivatori – è troppo grande e ingombrante per adattarsi al veicolo tipicamente utilizzato per fornire questo tipo di terapie alle cellule negli organismi viventi, vale a dire i virus adeno-associati (AAV). La mancanza di un sistema di consegna efficiente rende molto difficile l’uso di questo strumento nelle applicazioni cliniche.

La squadra di Izpisua Belmonte ha unito Cas9 / dCas9 con una serie di diversi interruttori attivatori per scoprire una combinazione che ha funzionato anche quando le proteine ??non erano fuse l’una con l’altra. In altre parole, Cas9 o dCas9 sono stati impacchettati in un unico AAV e gli switch, gli RNA guida sono stati impacchettati in un altro. Hanno anche ottimizzato gli RNA guida per assicurarsi che tutti i pezzi finissero nel punto desiderato nel genoma e che il gene mirato fosse fortemente attivato.

“I componenti lavorano tutti insieme nell’organismo per influenzare i geni endogeni”, dice Hsin-Kai (Ken) Liao, un componente dello staff di ricerca nel laboratorio Izpisua Belmonte e co-autore del nuovo articolo. In questo modo, la tecnologia opera in modo epigenetico, il che significa che influenza l’attività dei geni senza modificare la sequenza del DNA.

Per testare il metodo, i ricercatori hanno utilizzato modelli murini di danno renale acuto, diabete di tipo 1 e una forma di distrofia muscolare. In ciascun caso, hanno ingegnerizzato il loro sistema CRISPR / Cas9 per potenziare l’espressione di un gene endogeno che potrebbe potenzialmente invertire i sintomi della malattia. Nel caso della malattia renale, hanno attivato due geni noti per essere coinvolti nella funzione renale e hanno osservato non solo un aumento dei livelli delle proteine ??associate a tali geni, ma anche una migliore funzionalità renale a seguito di una lesione acuta. Per il diabete di tipo 1, miravano a potenziare l’attività dei geni che potevano generare cellule produttrici di insulina. Ancora una volta, il trattamento ha funzionato, abbassando i livelli di glucosio nel sangue in un modello murino di diabete. Per la distrofia muscolare, i ricercatori hanno espresso geni che si sono stati precedentemente mostrati per invertire i sintomi della malattia,

“Eravamo molto emozionati quando abbiamo visto i risultati nei topi”, aggiunge Fumiyuki Hatanaka, un ricercatore associato in laboratorio e coautore dello studio. “Possiamo indurre l’attivazione dei geni e allo stesso tempo vedere cambiamenti fisiologici”.

Il team di Izpisua Belmonte sta ora lavorando per migliorare la specificità del proprio sistema e applicarlo a più tipi cellulari e organi per trattare una gamma più ampia di malattie umane, nonché per ringiovanire organi specifici e invertire il processo di invecchiamento e le condizioni legate all’età come la perdita dell’udito e la degenerazione maculare. Saranno necessari ulteriori test di sicurezza prima delle prove sugli umani, dicono.



Un giorno potremmo vedere un vaccino per il diabete di tipo 1

Coinvolge un virus che può essere un fattore scatenante nella comparsa del diabete.

Quando senti la parola “vaccino”, potresti naturalmente pensare alle malattie infettive. Per più di 200 anni, la vaccinazione è stata mirata a prevenire una varietà di agenti patogeni addestrando il sistema immunitario ad essere pronto per un attacco. Questo concetto è stato efficace nel prevenire milioni di malattie ed è responsabile dell’eradicazione di uno dei peggiori flagelli dell’umanità, il vaiolo.

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La vaccinazione è un processo relativamente semplice con un unico obiettivo. Eppure, per anni, i ricercatori hanno visto alcuni vaccini svolgere il doppio compito. Non solo l’infezione iniziale viene arrestata, ma anche le condizioni croniche associate a una precedente infezione – note come sequele – possono essere prevenute.

Ci sono diversi esempi di questi benefici aggiunti dietro i vaccini. Ad esempio, il vaccino contro la poliomielite protegge da una devastante malattia neurologica chiamata sindrome post-polio . Il vaccino contro il morbillo previene una condizione neurologica lenta, progressiva e fatale, nota come panencefalite sclerosante subacuta, che si verifica anni dopo i sintomi usuali. L’aggiunta più recente è stata il vaccino contro il Virus del Papillomavirus Umano, che riduce al minimo le possibilità di cancro cervicale e di altro tipo .

Ora sembra esserci speranza per una nuova aggiunta all’elenco, grazie a un team di ricercatori finlandesi e svedesi. Hanno identificato un candidato vaccino con il potenziale per scongiurare una delle più croniche malattie, il diabete di tipo 1. I loro risultati rivelano che potremmo un giorno avere un mezzo per proteggere le persone che sono più a rischio di soffrire di questa condizione

Il ragionamento per questa linea di ricerca deriva da dati noti da più di mezzo secolo. I ricercatori hanno studiato un legame tra questa forma di diabete e un virus noto come coxsackievirus B1 o CB1. Il virus è noto per essere un patogeno significativo nei bambini e può essere pericoloso per la vita degli infanti .

Di solito, un’infezione causa solo sintomi lievi, come febbre, mal di gola e affaticamento. Ma possono sorgere problemi potenzialmente letali come l’encefalite, l’allargamento del cuore e l’epatite.

Per i bambini a rischio di diabete di tipo 1, tuttavia, sembra esserci un’altra complicazione. Gli studi hanno identificato un legame tra una precedente infezione CB1e l’insorgenza della malattia. Sebbene il meccanismo esatto continui a essere oggetto di dibattito, esistono prove sufficienti per suggerire che questo virus possa essere un fattore scatenante nell’iniziazione del diabete.

Poiché questa era una strada completamente nuova per la ricerca, il team ha lavorato con i topi. Per prima cosa hanno usato un tipo di roditori noto come topo diabetico non obeso , o NOD in breve. L’animale è incline a sviluppare il diabete di tipo 1 e l’infezione da CB1 ed è stato il modello perfetto per testare l’ipotesi.

La prima parte della sperimentazione prevedeva lo sviluppo di un vaccino appropriato contro il CB1. Lo hanno fatto facendo crescere il virus in laboratorio e poi uccidendolo usando un disinfettante noto come formaldeide. La procedura è in vigore da quasi un secolo e continua ad essere utilizzata fino ad oggi per garantire che i vaccini siano sicuri quando utilizzati.

A questo punto, i topi hanno ricevuto il vaccino nella speranza di vedere se avrebbe protetto gli animali dall’infezione. In tutti i casi, gli animali hanno prodotto una risposta immunitaria significativa e impedito al virus di diffondersi in tutto il corpo. Ciò ha suggerito che qualsiasi meccanismo che porta al diabete potrebbe essere fermato.

Poi è arrivato il test critico. Il team voleva scoprire se potevano bloccare il diabete con il vaccino. Hanno cambiato i topi in uno che sviluppa rapidamente il diabete dopo un’infezione virale. È conosciuto ufficialmente come il topo transgenico di segnalazione di soppressori di citochine, che viene comunemente chiamato SOCS1-tg. Se il gruppo era corretto, il vaccino avrebbe lasciato questi animali sani anche dopo l’infezione da CB1.

Quando i risultati sono arrivati, il team è stato lieto di vedere nessun cambiamento nei topi vaccinati rispetto a quelli sani. Guardando all’interno del corpo i ricercatori hanno trovato, proprio come con i topi NOD, non c’erano segni di CB1 nel pancreas. Il vaccino aveva funzionato per prevenire l’infezione e l’insorgenza del diabete.

I risultati di questo studio dimostrano il potenziale uso dei vaccini nell’aiutare a prevenire il diabete di tipo 1. Ciò apre la porta a ulteriori ricerche, che potrebbero arrivare allo sviluppo di candidati vaccinali per i test sugli esseri umani. Mentre questo potrebbe essere lontano anni, la nuova direzione può offrire speranza a coloro che ne soffrono.

Ci può essere un altro vantaggio nello sviluppo di un vaccino CB1 oltre alla protezione contro il diabete. Alla luce dei sintomi causati dal virus durante la normale infezione, l’uso della vaccinazione per proteggere neonati e bambini può valere il tempo, lo sforzo e il denaro. Dopotutto, come abbiamo appreso con altre malattie, una volta disponibile un vaccino, un’intera popolazione ne trae beneficio.

Articolo del prof di Microbiologia Jason Tetro pubblicato il 1 dicembre 2017 su Huffington Post Canada, tradotto per noi dal prof. Davon Carty, della Università di Albany (NY – USA)



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